Biología y geología 4ºA

PRÁCTICA TEST DE PATERNIDAD

MATERIALES:

Tiras de papel que representan ambas cadenas de ADN de los distintos individuos.
Las tijeras que representarán la enzima de restricción
Una cartulina blanca o folio blanco que será el gel de agarosa
Un subrayador fosforescente para colorear lo que será el marcaje fluorescente.

OBJETIVO:

Simular algunas técnicas específicas empleadas en la Ingeniería Genética.
Conocer y profundizar en algunas aplicaciones usadas en la Ingeniería Genética.
Discutir y decidir quién es el verdadero progenitor del niño y quién debería quedarse con la custodia de este mismo.

FUNDAMENTO TEÓRICO:

Una pareja que no puede tener hijos, por ser estéril la mujer, decide buscar una madre sustituta para tener un hijo. La madre de alquiler es inseminada artificialmente con el esperma del hombre. Cuando nace el bebé, la madre de alquiler decide quedárselo. Reclama al bebé diciendo que la pareja no tiene ningún derecho sobre el niño puesto que el verdadero padre es su propio marido y no el donante de esperma. El caso es llevado al juzgado y se realiza un test genético para decidir quién es el padre biológico del bebé. Todos nosotros somos biólogos que trabajamos en un laboratorio forense. Sabemos que cada individuo tiene una secuencia de bases de ADN única y diferente a la de cualquier otro, como resultado de la combinación de los genes de sus padres: a mitad proceden de la madre y la otra mitad del padre. Por tanto, el bebé ha que nacido tendrá mitad de los genes maternos y la otra mitad paternos. Después de averiguar quién es el padre de la criatura, cambiaremos de profesión y seremos jueces que tendremos que decir a quién es más justo entregar el bebé.

MÉTODO:
1. Obtención de la muestra de ADN:
Hemos obtenido una muestra de sangre del niño, de la madre de alquiler, de su marido y del donante esperma.
2. Aislamiento del ADN:
Mediante centrifugación de las muestras de sangre hemos separado el ADN celular.
3. Separación de las cadenas de ADN:
Hemos sometido al ADN a elevadas temperaturas que han separado las moléculas de ADN en sus dos cadenas. Ahora tenemos cadenas simples de ADN.
4. Recorta los trozos de ADN de cada individuo y pégalos.
5. Fragmentación de las cadenas de ADN:
Cada tubo de ensayo contiene las cadenas de ADN de cada uno de los individuos que hay que analizar. Cada muestra es tratada con una enzima de restricción que es capaza de reconocer la secuencia GGCC en las cadenas de ADN y corta por el centro de esta secuencia (GG/CC). En nuestra simulación la enzima de restricción son las tijeras.
6. Corta con las tijeras las cadenas de ADN cuando encuentres la secuencia GGCC simulando ser una Enzima de restricción.
7. Separación de los fragmentos de ADN:
Vamos a simular una técnica llamada electroforesis en gel de agarosa. Consiste en introducir las muestras en una placa de gel de agarosa (en nuestra práctica esta placa es la cartulina blanca). Se aplica una corriente eléctrica y los fragmentos descienden por la placa: los más pequeños descienden a la zona más alta de la placa y los más grandes se quedan en la parte más baja de la placa.
8. Pega los fragmentos de ADN en la placa de gel:
De forma que queden los más grandes abajo y los más pequeños arriba.
9. Identificación de los fragmentos de ADN:
Los fragmentos de ADN dispuestos en la placa en la realidad no pueden verse, por ello los biólogos introducen sondas fluorescentes que les permitirán identificar los distintos fragmentos de ADN. En nuestra práctica la sonda fluorescente lleva la secuencia GTA.
10. Pega las “sondas fluorescentes GTA” junto a todas y cada una de las secuencias CTA que aparezcan en los fragmentos de ADN.
11. Revelado de las sondas:
Las sondas fluorescentes brillan cuando se la placa está bajo luz ultravioleta. Y así podemos ver un patrón de rayas de forma que cada raya corresponde al lugar exacto donde hay un secuencia CAT en el ADN.
12. Pinta con un subrayador fosforescente la sonda y la secuencia de ADN complementaria.
13. En la parte de abajo de la cartulina, pinta barras negras en el lugar correspondiente según donde hayan quedado las sondas en cada muestra.
14. Comparación de los patrones de ADN de todas las muestras y obtención de conclusiones:
Se trata de comparar los patrones de rayas que aparecen en las muestras de los supuestos padres, de la madre de alquiler y de niño para descubrir semejanzas. La mitad de los marcajes del niño deben coincidir con los de la madre de alquiler y la otra mitad coincidirán con los del padre biológico.

PASOS 4, 5, 7 Y 8